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產(chǎn)品名稱:

伯氏疏螺旋體(BB)熒光探針法PCR試劑盒

產(chǎn)品型號: 產(chǎn)品時間: 2023-03-15
伯氏疏螺旋體(BB)熒光探針法PCR試劑盒是一種在分子生物學(xué)實驗中廣泛應(yīng)用的可靠性高、靈敏度高、對PCR反應(yīng)溫度控制要求嚴格等特點。使用此種PCR方法可以有效地幫助分子生物學(xué)家了解更多不同類型的生物信息。

產(chǎn)品概述

  【檢驗原理】
 
  伯氏疏螺旋體(BB)熒光探針法PCR試劑盒采用熒光探針檢測目標序列擴增程度的PCR技術(shù)。其方法是通過引入帶有熒光標記的探針分子,在擴增目標序列的同時檢測其PCR產(chǎn)物的有效擴增程度,從而確定是否有特定基因的存在。
 
  【使用特點】
 
  1. 精準度高,可靠性高,可檢測到極低限度的目標序列,檢測結(jié)果具有高度的精準度,可比較準確地判斷目標基因是否存在。
 
  2. 廣泛適用于基因定量、基因表達、突變檢測、病毒檢測等多種領(lǐng)域的研究和診斷。
 
  3. 伯氏疏螺旋體(BB)熒光探針法PCR試劑盒檢測結(jié)果可視化,檢測結(jié)果通過熒光信號表現(xiàn)出來,當(dāng)目標基因存在時,產(chǎn)物會呈現(xiàn)出熒光恒定,而無熒光信號則表示目標基因不存在。
 
  4. 采用的熒光探針選擇合理,能有效地減少PCR擴增的假陽性結(jié)果。
 
  【儲存條件及有效期】
 
  -20℃±5℃,避光保存、運輸、反復(fù)凍融少于 7 次,有效期 12 個月。
 
  【適用儀器】
 
  ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。
 
  說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。
 
  1.1 DNA 提取
 
  1) 對上述處理好的標本加入等體積核酸提取液(固體標本加入50μL 核酸提取液), 100℃恒溫處理 10min,13,000 rpm 離心 5min,取上清液轉(zhuǎn)移至新的 1.5mL EP 管,-20℃保存;
 
  2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。
 
  2. 檢測方法的局限性
 
  a. 樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關(guān);
 
  b. 樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
 
  c. 陽性對照、擴增產(chǎn)物泄漏,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果;
 
  d. 病原體在流行過程中基因突變、重組,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
 
  e. 不同的提取方法存在提取效率差異,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
 
  f. 試劑運輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結(jié)果;
 
  g. 本檢測結(jié)果僅供參考,如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。
 
  1.1 結(jié)果判斷
 
  陽性:檢測通道 Ct 值≤35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線。
 
  可疑:檢測通道 Ct 值>35.0,且出現(xiàn)典型擴增曲線的樣本建議重復(fù)試驗,重復(fù)試驗結(jié)果出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和典型擴增曲線者為陽性,否則為陰性。
 
  陰性:樣本檢測結(jié)果無 Ct 值且無明顯的擴增曲線。
 
  3. 質(zhì)控標準
 
  陰性質(zhì)控品:無明顯擴增曲線或無 Ct 值顯示;
 
  陽性質(zhì)控品:擴增曲線有明顯指數(shù)生長期,且 Ct 值≤32; 以上條件應(yīng)同時滿足,否則實驗視為無效。
 

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