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產(chǎn)品名稱:

產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)熒光PCR試劑盒

產(chǎn)品型號(hào): 產(chǎn)品時(shí)間: 2023-03-08
產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)熒光PCR試劑盒其易感染性和潛伏性給畜牧業(yè)以及貿(mào)易帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,因此產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌的快速準(zhǔn)確鑒定對(duì)該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用,為此本公司開發(fā)了簡單快捷的產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌熒光定量PCR檢測試劑盒。

產(chǎn)品概述

產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)熒光PCR試劑盒【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒采用探針法實(shí)時(shí)熒光 PCR 技術(shù),設(shè)計(jì)一對(duì)產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌特異性引物,結(jié)合一條特異性探針,用熒光 PCR 技術(shù)對(duì)產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測,用于臨床上對(duì)病原學(xué)輔助診斷。

 

【儲(chǔ)存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融少于 7 次,有效期 12 個(gè)月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

說明:不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用。

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1.1 結(jié)果判斷

陽性:檢測通道 Ct 值≤35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線。

可疑:檢測通道 Ct 值>35.0,且出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn),重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和典型擴(kuò)增曲線者為陽性,否則為陰性。

陰性:樣本檢測結(jié)果無 Ct 值且無明顯的擴(kuò)增曲線。

2. 檢測方法的局限性

a. 樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);

b. 樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果;

c. 陽性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會(huì)導(dǎo)致假陽性結(jié)果;

d. 病原體在流行過程中基因突變、重組,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

e. 不同的提取方法存在提取效率差異,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

f. 試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果;

g. 本檢測結(jié)果僅供參考,如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。

3. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品:無明顯擴(kuò)增曲線或無 Ct 值顯示;

陽性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長期,且 Ct 值≤32; 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,否則實(shí)驗(yàn)視為無效。

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1.1 DNA 提取

1) 對(duì)上述處理好的標(biāo)本加入等體積核酸提取液(固體標(biāo)本加入50μL 核酸提取液), 100℃恒溫處理 10min,13,000 rpm 離心 5min,取上清液轉(zhuǎn)移至新的 1.5mL EP 管,-20℃保存;

2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

 

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