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產品名稱:

乳酸桿菌(LB)實時熒光PCR檢測試劑盒

產品型號: 產品時間: 2023-03-08
乳酸桿菌(LB)實時熒光PCR檢測試劑盒其易感染性和潛伏性給畜牧業(yè)以及貿易帶來嚴重的經濟損失,因此乳酸桿菌的快速準確鑒定對該病的預防和檢疫有著重要作用,為此本公司開發(fā)了簡單快捷的乳酸桿菌熒光定量PCR檢測試劑盒。

產品概述

乳酸桿菌(LB)實時熒光PCR檢測試劑盒【檢驗原理】

本試劑盒采用探針法實時熒光 PCR 技術,設計一對乳酸桿菌特異性引物,結合一條特異性探針,用熒光 PCR 技術對乳酸桿菌?的核酸進行體外擴增檢測,用于臨床上對病原學輔助診斷。

 

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融少于 7 次,有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

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1.1 結果判斷

陽性:檢測通道 Ct 值≤35.0,且曲線有明顯的指數增長曲線。

可疑:檢測通道 Ct 值>35.0,且出現(xiàn)典型擴增曲線的樣本建議重復試驗,重復試驗結果出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和典型擴增曲線者為陽性,否則為陰性。

陰性:樣本檢測結果無 Ct 值且無明顯的擴增曲線。

2. 檢測方法的局限性

a. 樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關;

b. 樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結果;

c. 陽性對照、擴增產物泄漏,會導致假陽性結果;

d. 病原體在流行過程中基因突變、重組,會導致假陰性結果;

e. 不同的提取方法存在提取效率差異,會導致假陰性結果;

f. 試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結果;

g. 本檢測結果僅供參考,如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。

3. 質控標準

陰性質控品:無明顯擴增曲線或無 Ct 值顯示;

陽性質控品:擴增曲線有明顯指數生長期,且 Ct 值≤32; 以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。

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1.1 DNA 提取

1) 對上述處理好的標本加入等體積核酸提取液(固體標本加入50μL 核酸提取液), 100℃恒溫處理 10min,13,000 rpm 離心 5min,取上清液轉移至新的 1.5mL EP 管,-20℃保存;

2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產的DNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

 

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